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WS频谱仪对哮喘病人TMF－a诱生水平和血浆IL－8水平的影响

同济医科大学免疫学教研室梁智辉冯玮王立人

同济医院变成反应室钟瑞胜刘光辉

武汉铁路中心医院药剂科翟丽霞

嘟喘是一种常见的累及各年龄组的慢性肺疾病。尽管在治疗药物和设备方面有不少改进，但其发病率仍呈上升趋势。组织病理学及免疫学已证明气道炎症与哮喘发病有关。机体的免疫系统介导炎症反应。在此过程中，一些炎症细胞因子在炎症反应中起很重要的作用，如IL－1、TNF－a、IL－8。等。近年来，有人用周林频谱仪治疗哮喘并有很好的疗效。为了阐明周林频谱仪治疗哮喘的机制，我们以正常人作对照检测了哮喘患者的治疗前后TNF－R诱生水平和IL－8水平并探讨了它们在周林频谱仪治疗哮喘中的意义。

材料与方法

一、观察对象

（一）哮喘患者18例，男9例，女9例，平均年龄46.53±15.72。系同济医院变态反应科门诊病人，根据1993哮喘诊断与分极标准诊断为哮喘。过敏原皮试有一种或数种阳性。采血前未用过全身性糖皮质激素治疗。周林频谱仪治疗前采血检测TNF－a诱生水平和血浆IL－8水平作为对照。以上哮喘病人经周林频谱仪进行穴位（肺俞、定喘、足三里、丰隆）照射治疗，每天1h，持续15天，治疗后采血检测TNF－a诱生水平和血浆IL－8水平。

（二）平常对照组25例，男12例，女13例，平均年龄35.30±6.20。系武汉中心供血站献血员。

二、主要试剂和材料

（一） TNF－a检测试剂盒：军事医学科学院基础所生物制剂开发中心。

（二） IL－8检测试剂盒：西安第四军医大学免疫学教研室。

（三）大肠杆菌内毒素：上海第二军医大学微生物教研室。

三、实验方法

（一）全血TNF－a诱生：0.9ml肝素抗凝血加0.1mlLps(500ng/ml)，置37℃，5％CO2，培养6小时，离心沉淀，收集上清液备用。

（二） TNF－a水平检测：双抗体夹心法。参见试剂盒说明书。

（三）血浆IL－8检测：双抗体夹心法。参见试剂盒说明书。

四、数据处理各组均值差异进行t 检验。

结果

（一）周林频谱仪对哮喘患者诱生TNF－a水平的影响：各组TNF－a诱生水平比较：哮喘治疗前TNF－a诱生水平明显高于正常对照组（P＜0.001），而经周林频谱仪治疗后TNF－a诱生水平明显低于治疗前（P＜0.05），见表1

表1 各组TNF－a诱生水平比较

             组别       例数 TNF－a诱生水平（X±S pg/ml） 
         正常对照组（A） 20 664.56±316.18
         哮喘治疗前（B） 13 2332.80±944.5
         哮喘治疗后（C） 13 1490.61±689.77 
        
 A:B P＜0.001 A:C P＜0.001 B:C P＜0.05

( 二)周林频谱仪对血浆IL－8水平的影响

各组血浆IL－8水平比较:哮喘治疗前后血浆IL－8水平明显高于正常对照组（P＜0.05）；而哮喘患者治疗前后无显著性差异（P＞0.05）。见表2

表2 各组血浆IL－8水平比较

             组别       例数 IL－8水平（X±S pg/ml）
         正常对照组（A） 21 169.62±7.27
         哮喘治疗前（B） 14 181.91±23.63 
         哮喘治疗后（C） 14 182.16±35.77

A:B P＜0.05 A:C P＜0.05 B:C P＞0.05

讨论

TNF－a是由活化单核巨噬细胞产生的，是一种具有广泛生物学活性的炎症介质。动物实验表明TNF－a可引起全身和肺部的炎症反应，也能直接诱发支气管收缩。适量的TNF－a具有抗感染作用，而过量的TNF－a则介导炎症反应，TNF－a可使气道内皮细胞粘附分子表达，导致炎症反应；并可刺激血小板的激活因子、前列腺素、白三烯、过敏毒素等炎症介质合成，从而导致气道高反应性。本实验研究结果表明哮喘患者治疗前全血诱生TNF－a水平明显高于正常对组（P＜0.001），与文献报导一致。揭示哮喘患者机体内单核巨噬细胞可能处于一种超反应状态，易接受抗原类物质刺激而高度活化，产生高水平的TNF－a，从而介导气道炎症反应，而经周林频谱仪治疗后，其全血诱生TNF－a明显低于治疗前（P＜0.05 ），但仍明显高于正常对照组（P＜0.001）。说明周林频谱仪能降低哮喘者机体内单核巨噬细胞对抗原物质的超反应状态，使TNF－a诱生水平降低从而减轻炎症反应。 IL－8是由单核巨噬细胞、T细胞、中性粒细胞、血管内皮细胞等所产生，是已发现的趋化因子最强的一种，能激活中性粒细胞（趋化、脱颗粒、释放溶酶体、呼吸爆发反应和增加粘附分子的表达）。

IL－8从一发现开始就被当作一种炎症介质，在此期间有大量有关在多种不同病理状态下CXC（化学趋化因子）表达的文献充分证实了其炎症介质作用；在一些大量中性粒细胞浸润的肺部疾病中，如原发肺泡纤维化患者的肺泡巨噬细胞IL－8mRNA表达增高，IL－8数量、肺泡灌洗液中中性粒细胞的数量与疾病的严重程度有关；成人呼吸窘迫综合症（ARCS）和脓胸时，IL－8浓度升高，IL－8水平和中性粒细胞数目与ARDS有关。因此认为IL－8是变态反应性炎症疾病的潜能介质同时，IL－8受机体内多种细胞因子的调控，如IL－1、TNF－a都可诱导IL－8的产生；Van Deventer STH等报道TNF－a可诱导人体的IL－8释放。本实验结果表明：哮喘治疗前血浆IL－8水平明显高于正常对照组（P＜0.05 ），提示IL－8可能参与哮喘的气道炎症从而诱发哮喘发病；而经周林频谱仪治疗后IL－8水平与治疗前差异无显著性意义（P＞0.05 ），这可能与机体内的细胞因子的调控与机体炎症尚未消退有关，需进一步探讨。

本研究结果表明：周林频谱仪能有效地控制哮喘的症状与发作，其机能可能与降低巨噬细胞的高反应性，使TNF－a诱生水平有所降低，从而减轻其炎症介质作用，促使气道炎症的转归和好转。