WS-频谱治疗仪对小鼠恶性肿瘤治疗的实验研究

中国医学科学院基础医学研究所 李梅 高扬 李莉 林嘉友

为了探讨WS-频谱治疗仪照射对恶性肿瘤的治疗作用,我们应用周林频谱公司提供的WS-301C频谱仪照射实验性荷瘤小鼠,进行肿瘤的治疗观察。初步发现照射对小鼠实体瘤(S180)有较好的抑制效果,在二次重复实验中,对S180组的抑瘤率分别为58.6%和61.5%。对肝癌腹水型H22组及宫颈癌U14组早期可见抑制效果,但晚期与对照组判别不明显。重复两批实验均获得类似结果,具体实验情况报告如下。

材料和方法

(一) 动物及分组:实验动物选用昆明种小鼠,体重18-22克,雄性,由中国医学科学院实验动物中心提供。 动物分两组:实验照射组和非照射对照组,每组各10只。

(二) 仪器与照射方法:WS-301C频谱仪为云南生物医学工程研究所研制。 实验照射组应用上述仪器,调节扭在弱档处,距离35cm,每日上、下午各一次每次照射30分钟。S180组小鼠连续照射10天后处死,其它两种瘤株连续照射到死亡(三周)。

(三) 瘤细胞及接种量:S180瘤株购自中国医学科学院药物研究所肿瘤组;U14来源本所病理研究室;肝癌腹水型H22瘤株购自中医研究院基础部。 瘤细胞接种方法:均按常规于无菌条件下取出瘤细胞,用生理盐水按1:4稀释,每只小鼠皮下或腹腔接种0.2ml(含1×106个瘤细胞)。

(四) 观察指标:

1. S180瘤小鼠组:照射10天后杀死,取出小鼠肿瘤组织称重;并计算抑瘤率;瘤组织切片,进行组织学检查。

2. 肝癌腹水型H22组及宫颈癌U14组:连续照射三周后,观察动物的一般情况,腹水生长,动物存活时间及生命延长率。

其中,H22组于照射10天后,实验组和对照组各取2只小鼠的腹水,经离心洗涤后,瘤细胞团块用2.5%戊二醛固定,用0.1PBS洗涤,1%儿锇酸再固定,梯度丙酮脱水,E-pon812环氧树脂包埋,超薄切片后,经醋酸双氧铀及枸椽酸铝双梁色,JEM-2000EX型电镜观察。在电镜下观察癌细胞的超微结构。

实验结果

(一) 照射对小鼠S180瘤株的抑瘤作用列表1.

表1.照射对小鼠S180瘤株的抑瘤效果

批次 组别 动物数 瘤重(g)(X±SE) 抑瘤率(%) P值

1

2

对照
实验
对照
实验
10
10
10
10
1.30±0.66
0.50±0.46
1.16±0.53
0.48±0.37

61.5%

58.6%

<0.005

<0.005

1 对照实验 1010 <0.005 2 对照实验 1010 <0.005 抑瘤率%=(对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100%

(二) S180组瘤细胞的形态观察: 光镜下可见对照组瘤细胞呈典型的恶性特征,瘤细胞大小形态各异,核浆比值增大,核分裂相增多。实验组瘤细胞呈退形性变,胞质空化、核不完整或核固缩,核分裂相较少间质充血明显,且有少数炎性细胞浸润。 频谱仪照射对S180肿瘤生长的抑制率可以看出,照射组的肿瘤生长小于非照射组(见表1)。

(三) H22照射组和非照射对照组小鼠,于开始照射第一周时,可见照射组小鼠腹水长得慢且少,小鼠活动能力、一般状况明显比对照组好(见附录图B-1,B-2)。但两组小鼠继续照射观察到第三周,两组小鼠几乎全部死亡,死亡时间和死亡数两组未见有不同。

(四) H22组癌细胞的超微结构变化: 经照射10天的小鼠抽取腹水,电镜下可见:对照组细胞异型性明显,核大,有凹陷,核质比例大,实验组的胞核比较小,一般呈圆形或椭圆形(见附录图B-3,B-4)。细胞质内的细胞器变化主要在线粒体及粗面内质网,两组均可见线粒体肿胀,大小不一,嵴疏松、紊乱。且对照组的内质网扩张比较明显。从总的情况看,胞质的变化两组无明显差异(见附录图B-3,B-4)。

讨论

WS频谱治疗仪是通过模拟人体频谱,治疗疾病的生物治疗仪器。在临床上对多种疾病均有较好的治疗效果。基础医学研究证明,此仪器有改善局部微循环,消除微循环障碍,调节和平衡植物神经系统功能,促进新陈代谢,增进组织修复和再生功能。达到消炎止痛,促进愈合,活血通气等效果。本实验应用WS频谱仪照射荷瘤小鼠,在动物中观察其对实验性恶性肿瘤的治疗作用,目的在于研究和开发WS频谱仪对肿瘤的治疗作用。

研究证明,WS频谱仪照射对S180小鼠实验性恶性肿瘤具有较好的抑制作用。在二次重复性实验中,抑瘤率分别为58.6%和61.5%,对H22小鼠实验性肝腹水型肿瘤的生长,在照射早期(第一周)有一定的抑制肿瘤生长作用。但第二周后,动物的死亡率照射组与对照组比较无差异。对U14宫颈癌小鼠实验性肿瘤也未观察到治疗使用。WS频谱仪照射对实验性恶性肿瘤的治疗作用需进一步进行观察。特别是对WS频谱仪照射的剂量,距离,时间和室温等条件的最佳选择,均可直接影响治疗效果。