WS－频谱仪对小鼠免疫功能调节作用的研究

中国医学科学院基础医学研究所 林嘉友 高扬 李莉

利用周林频谱总公司提供的WS频谱治疗仪照射小鼠，研究其对小鼠免疫功能的调节作用，实验分三个部分：（1）频谱仪照射对正常小鼠和荷瘤（S180皮下型）状态下小鼠脾NK细胞杀伤功能的作用；（2）频谱仪照射对正常小鼠和荷瘤（S180皮下型）状态下抗体产生的影响；（3）频谱仪照射对正常小鼠和荷瘤（S180皮下型）状态下脾淋巴细胞对植物血凝素（PHA）增殖应答的影响，结果观察到频谱仪照射可增强荷瘤，非荷瘤小鼠NK细胞杀伤功能；频谱仪照射可降低荷瘤，非荷瘤小鼠抗体产生；照射可增强荷瘤与非荷瘤小鼠脾淋巴细胞对PHA的增殖应答。研究证明，WS－频谱仪照射对小鼠免疫功能有调节作用。

材料方法

（一） 动物及分组：实验动物选用昆明小鼠，体重18－22克，雄性，由中国医学科学院实验动物中心提供。 动物分四组：频谱仪照射组，又分为荷瘤组和非荷瘤组；频谱仪非照射组，又分为荷瘤组和非荷瘤组。

（二） 仪器和照射方法：WS－301C频谱仪为云南生物医学工程研究所研制。 实验照射组应用上述仪器，调节扭在弱档，距离35cm，每日上下午各一次每次照射30分钟，连续照射10天后进行实验，抗体组连续照射21天。

（三） 瘤细胞及接种剂量：S180瘤株购自中国医学科学院药物研究所肿瘤组； 瘤细胞接种方法：均按常规于无菌条件下取出瘤细胞，用生理盐水按1：4稀释，每只小鼠皮下或腹腔接种0.2ml（含1×106个细胞）。

（四） 实验项目及指标：

实验项目包括：

１． 应用乳酸脱氢酶（LDH）测定小鼠脾细胞NK杀伤活性。靶细胞为YAC－1细胞，效靶细胞的比例为10：1。统计比较NK细胞杀伤活性的增加或降低百分率

２． 应用人IgG作抗原和福氏不完全佐剂免疫动物，每只小鼠于0.5ml中含抗原400ug，BCG50ug，基础免疫1周后用上述同样剂量加强免疫1次，全程3周。放血分离血清用ELISA法测定抗人IgG抗体。统计抗体滴度比较组间差异。

３． 小鼠脾细胞对PHA的增殖应答实验，应用3H－TdR掺入法，PHA浓度为7ug/ml。每只小鼠脾细胞设4个复孔，统计cpm X±SE值，比较各组不同。

实验结果

１． 频谱仪照射对荷瘤，非荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性的作用，结果见表1。

表1．（活性％，X±SE）

2.频谱仪照射对荷瘤，非荷瘤小鼠抗体产生的影响结果见表2．

表2．抗体滴度（OD，X±SE）（血清1：20）

3频谱仪照射对荷瘤，非荷瘤小鼠脾细胞对PHA增殖应答的影响。结果见表3．

表3．（cpm, X±SE） n 照射组X±SE

讨论

模拟人体频谱研制而成的WS－频谱仪，对临床许多疾病有治疗效果，深受患者欢迎，具有广泛的应用价值。被认为频谱仪照射局部产生"内生热效应"，使照射局部的组织血循环改善，新陈代谢加快，从而加速组织的增生修复。此外，有个别实验报道，频谱仪照射对肿瘤细胞有抑制作用，细胞在照射状态下耗氧量比正常状态下增加3倍，而正常细胞可耐受缺氧，肿瘤细胞因缺氧造成死亡。通过频谱仪照射可减慢肿瘤的进程。

为了进一步探讨频谱仪的作用机理，扩大应用范围，我们在本研究中较系统全面地观察了WS－频谱仪对小鼠免疫功能的调节作用。研究发现小鼠在非荷瘤情况下，照射可提高小鼠的NK细胞杀伤活性和T细胞对PHA的增殖应答（P值＜0.01）；动物在荷瘤不利的应激情况下，频谱仪照射同样可提高动物的NK细胞和T细胞免疫功能（P＜0.01）。研究发现频谱仪照射对抗体的产生不论是荷瘤或非荷瘤情况下均起到抑制性的调节作用。对于频谱仪照射抑制抗体的机制值得进一步研究。对抗体抑制性的调节作用，可设想频谱仪有利于临床上以抗体为主介导的自身免疫疾病的治疗，例如红斑狼疮等。