北京医科大学生物物理教研室 吴本＿ 徐家＿ 于桂芬 栗刚

北京医科大学免疫教研室 邓玉兰 邓鸿业 黄大无 陈非

周林的频谱治疗仪能治疗感染性腹泻和慢性结肠炎等炎症性疾病，那末，这种治疗仪对免疫功能是否有效应？本文的目的是观察该治疗仪对正常动物免疫功能的影响。

材料与方法

（一） 动物和分组：实验动物为雄性成年C57BL／6小鼠，体重18－20克，由北京医科大学实验动物部提供。实验分一批进行，均设对照组和实验组。对第一批实验组治疗仪照射条件为连续照射10天，每天上午照射一次，每次照射40分钟，距离35cm。对第二批实验组照射条件改为每天上、下午各照一次，其余条件同第一批。

（二） 方法：

（1） 脾细胞总数的测定：每只小鼠脾脏制成5ml细胞悬液，用白细胞稀释20倍，在显微镜下计数。

（2） 脾脏淋巴细胞转化试验：每只小鼠的脾细胞用RPMI-1640营养液（含新生牛血清、青霉素、链霉素及谷氨酰胺）配成5×10个／ml的细胞悬液，于96孔细胞培养塑板中每孔加入0.1ml，共九孔，将九孔分为3组，第1组各孔再加入营养液0.1ml，第2组各孔再加入10μg/ml的CON A溶液（营养液配制），第3组各孔再加入10μg/ml的LPS溶液（营养液配制），加完后将细胞培养板放入37℃CO2 温箱培养46小时取出，各孔加入3H-胸腺嘧啶核苷0.2μg，继续培养6小时，用半自动细胞收获器收获细胞，用液闪计数器测量，用CPm值表示各孔细胞增殖反映的强弱。

（3） 脾脏T细胞亚组的荧光抗体分类检测方法：小鼠脾脏细胞用含0.1%NaN，5％NBS的Hanks液配成1×10 ml细胞悬浮液。取0.1ml（1×10细胞）加100μL抗体，4℃30分钟加入100μL1∶10稀释FITC标记兔抗大鼠IgG，4℃30分钟后用Hanks液洗三次，荧光显微镜（波长495nm）下计细胞荧光阳性百分率。

抗体结合百分率＝实验组荧光阳性－对照组荧光阳性率。

结果

（一） 脾细胞总数的测定：

第一批实验：细胞总数实验组与对照组对比无改变。

第二批实验：实验组降至对照组的64％，有极显著的减少（P＜0.001,表1）。

表1．脾细胞总数比较

（二） 淋巴细胞转化试验：

（1） 伴刀豆球蛋白A（CON A）刺激的淋巴细胞转化：

第一批实验中实验组与对照组相比无改变。

第二批实验中实验组增至对照组的152％，有极显著的增加（P＜0.001，表2）。

表2．ConA刺激引起淋巴细胞转化的比较

(2)脂多糖（LPS）刺激的淋巴细胞转化：

第一批实验中：实验组与对照组相比无改变

。 第二批实验中：实验组增至对照组的128％，有极显著的增加（P＜0.001，表3）。

表3．LPS刺激引起淋巴细胞转化的比较

（三） T细胞亚类数量变化：

在第一批实验中，实验组T细胞亚类L3T4 和LYT2的数量与对照组相比均无变化（表4）。

表4．T细胞亚类的数量变化

讨论

（1） 周林的频谱治疗仪是否产生生物效应与照射累积的能量水平密切有关。第一批实验每天照射一次，不产生任何效应；第二批实验每天照射二次，可使脾细胞总数减少和淋巴细胞转化率增加。表明该治疗仪效应的产生要求累积到一定的细胞能量水平，而且证明仪器照射产生的能量在细胞中有累积效应的。

（2） 治疗仪照射使脾细胞对T细胞促有丝裂素（ConＡ）和Ｂ细胞促有丝分裂素（ＬＰＳ）的增殖反应增加，这似提示治疗仪有增强淋巴细胞免疫功能的作用。考虑到治疗仪引起脾细胞总数的减少，这种增强不能除外是由于非Ｔ、Ｂ细胞的减少，而引起Ｔ、Ｂ细胞相对数量的增加。至于引起Ｔ、Ｂ细胞增殖反应的真正原因以及脾细胞总数减少是由哪些细胞参与的，有待进一步的实验研究。